Resident Evil Zero se odehrává ještě před událostmi prvního dílu, tudíž se jedná o prequel. Můžete se zhostit role buď Rebeccy Chambersové, medičky z Bravo Teamu, který se objevil v prvním dílu, nebo Billyho Coena, bývalého vojáka. Resident Evil Zero přináší zbrusu novou dějovou linku, která, díky tomu, že je zasazená ještě před první díl přináší několik šokujících odhalení, dozvíte se několik zákulisních informací a spoustu zajímavostí, díky kterým vám zombácká skládačka bude konečně dávat ucelený obrázek. Hra rovněž přináší systém volby charakter ...